Zer da PCR analisia?
Polimerasa katearen erreakzioa (PCR) analisia laborategiko teknika da, lagin baten DNA kopuru txikiak identifikatzeko asmoz. PCR anplifikazioan zehar, ADN interesgarria kopiatzen da behin eta berriz nahikoa analisi eta detektatzeko. Adibidez, PCRa DNAren kantitate txikiak identifikatzeko erabil daiteke, gernu-lagin batean dauden gonorrhea edo chlamydia eragiten duten organismoetatik.
Nola funtzionatzen du PCRak?
PCRren lehen urratsa lagina berotu nahi da, ADN bikoitzeko DNA bi hodi bakarretan banatzen denez, desnaturalizazioa deritzo. Ondoren, ADNaren sekuentziaren muturrak bat datozen ADN lagin laburrak DNA laginarekin konbinatzen dira. Ondoren, DNAren polimerasa DNAren erreplikazioa hasteko lehen kokapenean erabiltzen da. Azkenik, ADN berotzen da beste aldagai batzuk bereizteko, eta PCR prozesu osoa berriro hasten da.
Laginean dauden DNAren segmentu interesen kopurua etengabe handitzen da PCR ziklo bakoitzean: kopia bi bihurtzen da, lau bihurtzen da, gero zortzi, etab; beraz, oro har, 20-40 ziklo bakarrik behar dira ADNak aurkezten duen zehazteko (eta, hala badagokio, lagin nahikoa aztertzeko).
Polimerasaren katearen erreakzioaren urrats guztiak - ADNa deskonposatzea, primerra aplikatuz eta ADNa luzatuz - tenperatura ezberdinetan gertatzen dira, beraz, hasierako nahasketaren ondoren, urratsak termokimikalizazio prozesu baten bidez kontrolatzen dira, Tenperatura beharrezkoak diren mailetan egongo da nahikoa denbora tarte bakoitzean.
Horrela, PCRa xede DNAaren zenbatekoa aztertzeko modu eraginkorra da.
Polimerasa katearen erreakzioa teknologia biologikoan iraultza izan zen 80ko hamarkadaren hasieran garatu zenean, eta PCRren sortzailea, Kary Mullis, kimikako Nobel Saria irabazi zuen 1993an.
Zergatik da PCRa ETS Testing esanguratsua?
Polimerasa katearen erreakzioa, eta ligase katearen erreakzioarekin erlazionatutako teknikak, gero eta garrantzi handiagoa du STDen azterketan. Teknika horiek zuzenean identifikatzen dituzte ADN birikoak edo RNA laginetan. Patogenoaren kode genetikoa identifikatzea ez da beharrezkoa patogenoa bizirik irautea, hala nola bakterioen kultura edo kultura birikoa . Gainera, ez da beharrezkoa infekzioa duela aspaldi nahikoa gertatu den pertsona antigorputz erreakzio detektagarria garatzea (adibidez, ELISAk detektatu du). Horrek esan nahi du PCR teknikak zenbait gaixotasun antzeman ditzakeela beste proba batzuk baino lehen, eta ez asko egon behar dute laginak bizirik mantentzeko edo une egokian probatzeko.